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      厭氧培養箱的操作流程

      發布日期:2019/3/26 15:15:13 點擊數:1275

                                  厭氧培養箱的操作流程

      (一) 操作室厭氧環境形成:
        1. 按使用要求放置好必要的附件和器具;
        2. 通電源開照明燈,開溫控儀,調節所需溫度;
        3. 操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示紙
      (封閉);
        4. 關緊取樣室內外門,并抽真空校驗;
        5. 操作室內第一次置換(氮氣置換):
        A. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
        B. 接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥1,使手套鼓起,關閉閥門1,然后
      扎緊袋口;
           6. 操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,取樣室先抽真空,
      并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續三次氮氣置換。
           7. 操作室第四次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、
      CO2 5%)
            A. 調換氣路打開混合氣閥3進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用
      腳踏開關開閉排氣;
            B. 關掉混合氣體閥3,并打開閥5,使混合氣體經過流量計,調整流
      量計,流量為每分鐘10ml左右;
            C. 混合氣體重復2-3次轉換,經過上述過程,基本形成厭氧環境。
           8. 操作室內打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時
      后打開美蘭指示紙觀察其變色情況,不變色為操作室內達到厭氧環境;
           9. 開紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。
      (二)菌種的置入和培養:
        1. 檢查取樣室內門并關緊;
        2. 打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門;
        3. 取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)
      以上停,然后人工打開氮氣閥2進氣,使指針回復零位,關掉閥2。第
      二次重復操作一次。第三次操作時,使真空度500ml汞柱(66kPa)以
      上停,然后打開閥4進混合氣,使指針回復零位,關掉閥4。取樣室充
      氮置換三次過程結束;
          4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數;
          5. 取樣室外門開啟、關緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;
          6. 厭氧培養箱需要長期連續使用的條件:
           A. 每天在操作室內打開美蘭指示紙觀察,如不正常就必須重新換氣;
           B. 要長期連續輸入微量的混合氣體,使補進的氮氣能和微量的氧結合通
      過催化吸收,保證室內厭氧狀態,補入混合氣流量選定為每分鐘10ml
      左右;
           C. 連續培養運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
           D. 操作室內溫度可任意選擇和控制。
          7. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整:調節減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。
        



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